چکیده
در این تحقیق (اولین شناسایی یک گونه ی مینوز که در اواخر زمستان فعالیت میکند) که در فصل زمستان برای اولین بار انجام گردید، مشخصات ژنتیکی شب پره ی کامل بطور خلاصه و باتوجه به اطلاعات موجود مورد بررسی قرار گرفت.
اطلاعات موجود شامل دامنه ی پراکندگی شب پره و گونه های مختلف گیاهی میزبان بودند. علاوه بر این بارکدهای ژنتیکی مولکولهای دی ان آ شب پره به دقت موردشناسایی قرار گرفته و نسبت به گونه های دیگر جهت بررسی ارائه گردید.
شب پره
این شب پره دارای گروه های مختلف مینوز برگ می باشد و تاکنون ۱۸۸۰ گونه مربوط به این خانواده در سراسر جهان مورد بررسی قرار گرفته است. از بین این تعداد ۴۰۱ گونه از این خانواده بسیار مهم بوده و شامل شب پره های کوچک و براقی هستند که رفتار بخصوصی را در مواقع نشستن از خود بروز می دهند.
این رفتار بخصوص، قرار گرفتن بدن شب پره بصورت کاملا موازی با سطح زمین بوده که سر شب پره بطرف پایین قرار می گیرد.
این نوع شب پره که شامل مینوز زمستانه ی برگ است، در ابتدا بعنوان آفت گیاهان جنگلی در کشور کره معرفی گردید. بعدا در سال ۱۹۸۳، ۱۰ نوع شب پره از همین گونه در مناطق مختلف شناسایی و گزارش شد. در سال ۱۹۸۶، ۳ نوع جدید از همین گونه نیز توسط آقایان پارک و هان مورد بررسی قرار گرفت.
اخیرا یک نوع جدید شب پره از همین گونه تبدیل به یک آفت خطرناک شده که عمدتا به درختان مرکبات در مناطق مختلف جنوب کشور کره حمله و عامل اصلی خسارت مینوز زمستانه ی برگ بر روی درختان مرکبات در این کشور است.
در این تحقیق ما یک نوع از این آفت را که برای اولین بار در ماه اکتبر ۲۰۱۴ در قسمت های جنوب شرق کره گزارش گردیده، آن را تا ماه ژانویه ی ۲۰۱۵ مورد بررسی قرار داده ایم. این نوع آفت مینوز زمستانه بصورت یک آفت اپیدمی در کشور ژاپن نیز شناسایی شده اما موطن اولیه ی آن کشور کره می باشد.
مشخصات ژنتیکی این آفت ابتدا بطور خلاصه مورد بررسی قرا گرفته و اطلاعات مهمی شامل دامنه ی پراکندگی آن و گیاهان مختلف میزبان مورد بحث و بررسی قرار می گیرند. علاوه براین بارکدهای ژنتیکی مولکول دی ان آ این حشره جهت شناسایی دقیق آن مورد مطالعه و بررسی قرار می گیرند.
جهت شناسایی این آفت از چه روش ها و موادی استفاده شده است؟
تمام مواد مورد نیاز در این تحقیق از منطقه ی پالکونگ کره جمع آوری شده و هم اکنون در بخش حشره شناسی دانشگاه هانام کره نگه داری می شود.
حشره های بالغ از دو جنس نر و ماده جهت انجام آزمایشات ژنتیکی کالبدشکافی شدند و نمونه های انتخاب شده بر روی اسلایدهای شیشه ای فیکس و سپس در روند بررسی و تحقیق قرار گرفتند.
عکس هایی از نمونه ها بوسیله ی دوربین دیجیتال که به میکروسکوپ وصل بود، تهیه گردید. آنزیم سایتوکروم سی اکسیدز بعنوان واحد ژنی جهت بارکد کردن مولکول دی ان آ و برطبق پروتکل های ارائه شده از دانشگاه انتاریو کانادا انتخاب گردید.
با استفاده از روش ال (پی ای پی اف ۱) و ( ال ای پی آر وان) مولکول دی ان آ بزرگنمایی گردید.
عکس العمل زنجیره ی پلیمرها بمنظور انجام عمل بزرگنمایی بمدت ۵ دقیقه و در درجه حرارت ۹۴ درجه سانتیگراد و در طول ۵چرخه به ترتیب
به مدت ۳۰ ثانیه در ۹۴ درجه سانتیگراد،
۳۰ ثانیه در ۴۵ درجه سانتیگراد،
یک دقیقه در ۷۲ درجه سانتیگراد،
۴۰ سیکل در ۹۴ درجه سانتیگراد به مدت ۳۰ ثانیه،
۵۱ درجه سانتیگراد به مدت ۳۰ ثانیه،
۷۲ درجه سانتیگراد به مدت یکدقیقه و ۷۲ درجه سانتیگراد به مدت ۷ دقیقه، قرار گرفته شد.
تمام این سیکل ها بعد از بزرگنمایی، کدگذاری شدند.
مشخصات ظاهری
مشخصات حشره ی نر و ماده ی بزرگسال در آزمایشگاه حشره شناسی در دانشگاه کالیسوی ژاپن به شرح زیر مورد بررسی قرار گرفت:
پهنای بال حشره به مقیاس ۷ الی ۸ میلی متر. طول سر و سینه به ترتیب به مقیاس ۱.۵ و ۱.۷ میلی متر.
سطح پوششی سر حشره با پولک های سفید و براق پوشیده شده که مخلوطی از رنگ های سفید و قهوه ای متمایل به زرد نمایان است. رنگ چشمان مرکب حشره کاملا مشکی و آنتن ها بصورت شانه ای که با پولک های قهوه ای رنگ پوشیده شده، نمایان است.
شاخک ها کاملا بلند بوده و خرطوم ها نیز بلند می باشد. بخش زیرین دهان حشره با پولک های سفید و سینه ی حشره با پولک های زرد طلایی پوشیده شده و دارای دو خط عمودی مورب بود.
بالهای جلویی استوانه ای شکل بوده و به رنگ زرد متمایل به قهوه ای با رگه های سفید، بالهای عقبی به رنگ خاکستری و دارای سه جفت خط سفید و بالهای عقبی نسبت به بالهای جلویی باریکتر است. معمولا حشره ی ماده دارای جثه ی بزرگتر از حشره ی نر می باشد.
بیولوژیک حشره
حشرات بالغ در فصل زمستان معمولا در ماه ژانویه بعد از گذراندن مرحله ی لاروی در پاییز، نمایان می شوند. قبل از نمایان شدن حشرات بالغ، شفیره های حشره از روی گیاه میزبان جدا و معمولا این گونه از حشره ی مینوز زمستانه در کشور ژاپن به صورت شفیره زمستان گذاری می کند و در اوایل بهار، نمایان می گردد.
نتیجه گیری
حشره ی آفت مینوز زمستانهی برگ، بعنوان یک اپیدمی در کشور ژاپن مطرح می باشد این آفت برای اولین بار در جنوب شرق کشور کره مورد بررسی و گیاه میزبان این حشره به وفور در مناطق جنوبی کشور کره یافت می شود.
مناطقی که در آنها این حشرات جمع آوری شده، نزدیک دره ای بود که با درختان بلوط پوشیده شده، و گیاهان میزبان در فضاهای بین درختان بلوط به وفورر یافت می شوند.
لارو حشره تونل های بیضی شکلی را بر روی برگهای درختان میزبان و در زیر بشره ی برگ ایجاد می کرد. چرخه ی زندگی گونه های مختلف حشره بدقت مطالعه نشده است اما پدیدار شدن گونه ای از این حشره در فصل زمستان بسیار چشمگیر می باشد.
در این تحقیق ما شفیره های حشره را از روی برگ های جدا شده و به زمین افتاده در ماه اکتبر جمع آوری کردیم و حشرات بالغ در ماه ژانویه نمایان گردیدند.
در کشور ژاپن حشرات بالغ در ماه های اکتبر و نوامبر و اوایل بهار نمایان می گردند. اما بررسی های دقیقی بمنظور شناسایی فصل پرواز حشره و یافتن دلایل اینکه چرا حشرات بالغ در فصل سرد نمایان می شوند باید انجام گیرد.
سوالات متداول درباره اولین شناسایی یک گونه ی مینوز که در اواخر زمستان فعالیت میکند
۱) مشخصات ظاهری شب پره چیست؟
-پهنای بال حشره به مقیاس ۷ الی ۸ میلی متر. طول سر و سینه به ترتیب به مقیاس ۱.۵ و ۱.۷ میلی متر.
-سطح پوششی سر حشره با پولک های سفید و براق پوشیده شده
-رنگ چشمان مرکب حشره کاملا مشکی و آنتن ها بصورت شانه ای که با پولک های طریف قهوه ای رنگ پوشیده شده
-شاخک ها کاملا بلند بوده و خرطوم ها نیز بلند می باشد. بخش زیرین دهان حشره با پولک های سفید پوشیده شده است.
-سینه ی حشره با پولک های زرد طلایی پوشیده شده و دارای دو خط عمودی مورب.
-بالهای جلویی استوانه ای شکل بوده و به رنگ زرد متمایل به قهوه ای با رگه های سفید است.
-بالهای عقبی به رنگ خاکستری و دارای سه جفت خط سفید بوده. بالهای عقبی نسبت به بالهای جلویی باریکتر هستند.
-معمولا حشره ی ماده دارای جثه ی بزرگتر از حشره ی نر می باشد.
مترجم: سارا زندی/